TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit

पीसीआर तपासणीसाठी विविध साहित्यांमधून डीएनएचे जलद शुद्धीकरण.

TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit एक अनोखी पॅकेजिंग रचना स्वीकारते ज्यात जलद जीनोमिक डीएनए तयारी आणि PCR प्रवर्धनासाठी सर्व अभिकर्मकांचा समावेश असतो. हे विविध नमुने (वनस्पती ऊतक, बियाणे, प्राण्यांचे उती, रक्त, यीस्ट आणि बॅक्टेरिया) आणि त्यानंतरच्या पीसीआर प्रवर्धन आणि तपासणीपासून एक-चरण जीनोम डीएनए शुद्धीकरणासाठी लागू आहे. प्रथिने, आरएनए आणि इतर दुय्यम मेटाबोलाइट्स काढणे, सेंद्रिय विलायक काढणे तसेच इथेनॉल पर्जन्य पायर्या संपूर्ण शुद्धीकरण प्रक्रियेत आवश्यक नाहीत, ज्यामुळे ऑपरेशन सोपे आणि जलद होते. उत्पादनाची गुणवत्ता स्थिर आणि विश्वासार्ह आहे.

या किटद्वारे प्रदान केलेले 2 -डेट पीसीआर मास्टरमिक्स एक अत्यंत सुसंगत पीसीआर अभिकर्मक आहे जे प्रथिनांसारख्या अशुद्धी काढून टाकल्याशिवाय डीएनए प्रभावीपणे आणि विशेषतः वाढवू शकते. या अभिकर्मकात Taq DNA polymerase, dNTPs, MgCl असते₂, पीसीआर प्रतिक्रियेसाठी बफर, तसेच वर्धक, ऑप्टिमायझर आणि स्टॅबिलायझर. अभिकर्मकाच्या वापरामुळे पीसीआर प्रतिक्रिया जलद, साधी, संवेदनशील, विशिष्ट आणि स्थिर होते. म्हणून, हे किट विशेषतः उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंगसाठी योग्य आहे.

मांजर. नाही	पॅकिंग आकार
4992527	20 µl × 50 rxn
4992528	20 µl × 200 rxn

आम्हाला ईमेल पाठवा

उत्पादन तपशील

प्रायोगिक उदाहरण

वारंवार विचारले जाणारे प्रश्न

उत्पादन टॅग

वैशिष्ट्ये

■ साधे आणि वेगवान: द्रव ऊतक पासून डीएनए द्रव नायट्रोजन दळण्याची गरज न घेता 5 मिनिटात काढता येतो.
Applications विस्तृत अनुप्रयोग: वनस्पतीची पाने, बियाणे, प्राण्यांच्या उती, रक्ताचे नमुने (ताजे रक्त, अँटीकोआग्युलेशन, रक्ताच्या गुठळ्या, वाळलेल्या रक्ताचे डाग इ.), यीस्ट आणि बॅक्टेरियासाठी लागू.
Compat मजबूत सुसंगतता: पीसीआर अभिकर्मक विविध नमुना स्त्रोतांमधून काढलेल्या डीएनएच्या प्रवर्धनासाठी योग्य आहे.

अनुप्रयोग

■ जनुक शोध: मोठ्या प्रमाणावर जनुक शोधण्यासाठी आदर्श पर्याय.

महत्वाच्या नोट्स

Cotton कपाशीच्या पानांसारख्या उच्च स्तरीय फिनॉल असलेल्या नमुन्यांसाठी, नमुना इनपुटची मात्रा 0.4 मिलीग्रामपेक्षा कमी असावी, अन्यथा पीसीआर प्रतिक्रिया प्रभावित होईल.

सर्व उत्पादने ODM/OEM साठी सानुकूलित केली जाऊ शकतात. तपशीलांसाठी,कृपया सानुकूलित सेवा (ODM/OEM) वर क्लिक करा

मागील: GMO क्रॉप एक्सट्रॅक्शन आणि अॅम्प्लिफिकेशन किट

पुढे: रक्त थेट पीसीआर किट

	अनुक्रमे 5 मिग्रॅ पाने आणि कॉर्न, गहू, तांदूळ, सोयाबीन आणि कापसाच्या बियाण्यांमधून डीएनए काढला गेला. पीसीआरद्वारे विशिष्ट प्राइमर वापरून डीएनए वाढवला गेला. एकूण 20 μl इलुएंट्समधून 6 μl डीएनए प्रति लेन लोड केले गेले. 1: सकारात्मक नियंत्रण जीनोम; 2: नमुने सोडा; 3: बियाणे नमुने; 4: एनटीसी; 5: डी 2000 प्राइमर
	M: TIANGEN मार्कर D2000; 1: सकारात्मक नियंत्रण; 2-7: फिल्टर पेपरवर वाळलेल्या रक्ताच्या डागांची संख्या अनुक्रमे 1-6 आहे; 8: नकारात्मक नियंत्रण. 3 मिमी पंचरचा वापर फिल्टर पेपरमधून वाळलेल्या रक्ताचे डाग काढण्यासाठी चाचणी सामग्री म्हणून केला गेला. एकूण 20 μl इलुएंट्समधून 6 μl डीएनए प्रति लेन लोड केले गेले.
	M: TIANGEN मार्कर D2000; 1: सकारात्मक नियंत्रण (जीनोमिक डीएनए टेम्पलेट म्हणून वापरले गेले); 2-7: जोडलेल्या रक्ताचे प्रमाण अनुक्रमे 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl आणि 60 μl आहेत; 8-13: जोडलेल्या रक्ताचे प्रमाण अनुक्रमे 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl आणि 60 μl आहेत; 14: एनटीसी. एकूण 20 μl eluents मधून 6 μl DNA agarose gel वर लोड केले गेले.

प्रश्न: प्रवर्धन बँड नाहीत

A-1 साचा

Template टेम्पलेटमध्ये प्रथिनेची अशुद्धता किंवा टाक इनहिबिटर वगैरे असतात. DNA डीएनए टेम्पलेट शुद्ध करा, प्रोटीनची अशुद्धता काढून टाका किंवा शुध्दीकरण किटसह टेम्पलेट डीएनए काढा.

Template टेम्पलेटचे विकृतीकरण पूर्ण झाले नाही den योग्यरित्या विकृतीकरण तापमान वाढवा आणि विकृतीकरण वेळ वाढवा.

■ टेम्पलेट डिग्रेडेशन the टेम्पलेट पुन्हा तयार करा.

ए -2 प्राइमर

Pri प्राइमरची खराब गुणवत्ता-प्राइमर पुन्हा संश्लेषित करा.

■ प्राइमर डिग्रेडेशन —— उच्च एकाग्रतेच्या प्राइमर्सला संरक्षणासाठी लहान प्रमाणात विभाजित करा. एकाधिक गोठवणे आणि पिघलना किंवा दीर्घकालीन 4 ° C क्रायोप्रेस्ड टाळा.

Pri प्राइमर्सची अयोग्य रचना (उदा. प्राइमरची लांबी पुरेशी नाही, प्राइमरच्या दरम्यान डायमर तयार होतो इ.)

A-3 Mg²⁺एकाग्रता

■ एमजी²⁺ एकाग्रता खूप कमी आहे - Mg मध्ये योग्य वाढ करा²⁺एकाग्रता: एमजी ऑप्टिमाइझ करा²⁺ इष्टतम एमजी निर्धारित करण्यासाठी 0.5 मिमीच्या अंतराने 1 एमएम ते 3 एमएम पर्यंत प्रतिक्रियांच्या मालिकेद्वारे एकाग्रता²⁺ प्रत्येक टेम्पलेट आणि प्राइमरसाठी एकाग्रता.

ए -4 एनीलिंग तापमान

An उच्च एनीलिंग तापमान प्राइमर आणि टेम्पलेटच्या बंधनावर परिणाम करते. Neनीलिंग तापमान कमी करा आणि 2 ° C च्या ग्रेडियंटसह स्थिती अनुकूल करा.

A-5 विस्तार वेळ

■ लहान विस्तार वेळ extension विस्तार वेळ वाढवा.

प्रश्न: खोटे सकारात्मक

घटना: samplesणात्मक नमुने देखील लक्ष्य अनुक्रम बँड दर्शवतात.

पीसीआरचे ए -1 संदूषण

Target लक्ष्य अनुक्रम किंवा प्रवर्धन उत्पादनांचे क्रॉस दूषण - sampleणात्मक नमुन्यात लक्ष्य अनुक्रम असलेले नमुना पाईपेट करू नये किंवा त्यांना सेंट्रीफ्यूज ट्यूबमधून बाहेर टाकू नये. विद्यमान न्यूक्लिक acसिड नष्ट करण्यासाठी अभिकर्मक किंवा उपकरणे स्वयंचलित केली पाहिजेत आणि नकारात्मक नियंत्रणाच्या प्रयोगांद्वारे दूषित होण्याचे अस्तित्व निश्चित केले पाहिजे.

■ अभिकर्मक दूषित the अभिकर्मक आणि कमी तापमानावर साठवा.

ए -2 प्राइमr

■ एमजी²⁺ एकाग्रता खूप कमी आहे - Mg मध्ये योग्य वाढ करा²⁺ एकाग्रता: एमजी ऑप्टिमाइझ करा²⁺ इष्टतम एमजी निर्धारित करण्यासाठी 0.5 मिमीच्या अंतराने 1 एमएम ते 3 एमएम पर्यंत प्रतिक्रियांच्या मालिकेद्वारे एकाग्रता²⁺ प्रत्येक टेम्पलेट आणि प्राइमरसाठी एकाग्रता.

■ अयोग्य प्राइमर डिझाइन, आणि लक्ष्य अनुक्रमामध्ये लक्ष्य नसलेल्या अनुक्रमासह एकरूपता आहे. -प्राइमर पुन्हा डिझाइन करा.

प्रश्न: विशिष्ट नसलेले प्रवर्धन

घटना: पीसीआर प्रवर्धन बँड अपेक्षित आकाराशी विसंगत असतात, एकतर मोठे किंवा लहान, किंवा कधीकधी दोन्ही विशिष्ट प्रवर्धन बँड आणि विशिष्ट नसलेले प्रवर्धन बँड होतात.

ए -1 प्राइमर

Pri खराब प्राइमर विशिष्टता

-प्राइमर पुन्हा डिझाइन करा.

■ प्राइमर एकाग्रता खूप जास्त आहे - योग्यरित्या विकृतीकरण तापमान वाढवा आणि विकृतीकरण वेळ वाढवा.

A-2 Mg²⁺ एकाग्रता

Mg एमजी²⁺ एकाग्रता खूप जास्त आहे - Mg2+ एकाग्रता योग्यरित्या कमी करा: Mg ऑप्टिमाइझ करा²⁺ इष्टतम एमजी निर्धारित करण्यासाठी 0.5 मिमीच्या अंतराने 1 एमएम ते 3 एमएम पर्यंत प्रतिक्रियांच्या मालिकेद्वारे एकाग्रता²⁺ प्रत्येक टेम्पलेट आणि प्राइमरसाठी एकाग्रता.

ए -3 थर्मोस्टेबल पॉलिमरेज

En जास्त सजीवांच्या शरीरात निर्मार्ण होणारे द्रव्य प्रमाण en 0.5 U च्या अंतराने सजीवांच्या शरीरात निर्मार्ण होणारे द्रव्य प्रमाण योग्यरित्या कमी करा.

ए -4 एनीलिंग तापमान

Ne neनीलिंग तापमान खूप कमी आहे rop neनीलिंग तापमान योग्यरित्या वाढवा किंवा दोन-स्टेज अॅनीलिंग पद्धत स्वीकारा

A-5 PCR सायकल

PC खूप जास्त पीसीआर सायकल - पीसीआर सायकलची संख्या कमी करा.

प्रश्न: पॅची किंवा स्मीयर बँड

ए -1 प्राइमरOor खराब विशिष्टता-प्राइमरची पुन्हा रचना करा, प्राइमरची स्थिती आणि लांबी बदलून त्याची विशिष्टता वाढवा; किंवा नेस्टेड पीसीआर करा.

A-2 साचा DNA

- टेम्पलेट शुद्ध नाही - टेम्पलेट शुद्ध करा किंवा शुध्दीकरण किटसह डीएनए काढा.

A-3 Mg²⁺ एकाग्रता

—— एमजी²⁺ एकाग्रता खूप जास्त आहे - एमजी योग्यरित्या कमी करा²⁺ एकाग्रता: एमजी ऑप्टिमाइझ करा²⁺ इष्टतम एमजी निर्धारित करण्यासाठी 0.5 मिमीच्या अंतराने 1 एमएम ते 3 एमएम पर्यंत प्रतिक्रियांच्या मालिकेद्वारे एकाग्रता²⁺ प्रत्येक टेम्पलेट आणि प्राइमरसाठी एकाग्रता.

A-4 dNTP

- डीएनटीपीची एकाग्रता खूप जास्त आहे - डीएनटीपीची एकाग्रता योग्यरित्या कमी करा

ए -5 एनीलिंग तापमान

Low खूप कमी neनीलिंग तापमान - neनीलिंग तापमान योग्यरित्या वाढवा

A-6 सायकल

- बरीच सायकल - सायकल संख्या ऑप्टिमाइझ करा

प्रश्न: 50 μl पीसीआर रि systemक्शन सिस्टीममध्ये किती साचा डीएनए जोडला जावा?

प्रश्न: लांब तुकडे कसे वाढवायचे?

पहिली पायरी म्हणजे योग्य पॉलिमरेज निवडणे. 3'-5 'एक्झोन्यूक्लीझ अॅक्टिव्हिटीच्या अभावामुळे नियमित टाक पॉलिमरेझ प्रूफरीड करू शकत नाही आणि न जुळल्याने तुकड्यांची विस्तार कार्यक्षमता मोठ्या प्रमाणात कमी होईल. म्हणून, नियमित ताक पॉलिमरेझ 5 केबी पेक्षा मोठ्या लक्ष्यित तुकड्यांना प्रभावीपणे वाढवू शकत नाही. विस्तार कार्यक्षमता सुधारण्यासाठी आणि दीर्घ खंड प्रवर्धनाच्या गरजा पूर्ण करण्यासाठी विशेष सुधारणा किंवा इतर उच्च निष्ठा असलेल्या पॉलिमरेझसह ताक पॉलिमरेज निवडले पाहिजे. याव्यतिरिक्त, लांब तुकड्यांच्या प्रवर्धनासाठी देखील प्राइमर डिझाइन, डिनाटुरेशन वेळ, विस्तार वेळ, बफर पीएच इत्यादींचे समायोजन आवश्यक आहे, सहसा, 18-24 बीपी सह प्राइमर चांगले उत्पादन देऊ शकतात. टेम्पलेटचे नुकसान टाळण्यासाठी, 94 ° C वर विकृतीकरण वेळ प्रति सेकंद 30 सेकंद किंवा त्यापेक्षा कमी असावा आणि प्रवर्धन करण्यापूर्वी तापमान 94 ° C पर्यंत वाढवण्याची वेळ 1 मिनिटापेक्षा कमी असावी. शिवाय, विस्तार तपमान सुमारे 68 ° C वर सेट करणे आणि 1 kb/min च्या दरानुसार विस्तार वेळेची रचना करणे लांब तुकड्यांचे प्रभावी प्रवर्धन सुनिश्चित करू शकते.

प्रश्न: पीसीआरची प्रवर्धन निष्ठा कशी सुधारता येईल?

उच्च निष्ठा असलेल्या विविध डीएनए पॉलिमेरेसचा वापर करून पीसीआर प्रवर्धनाचा त्रुटी दर कमी केला जाऊ शकतो. आतापर्यंत सापडलेल्या सर्व ताक डीएनए पॉलिमेरेसमध्ये, पीएफयू एंजाइममध्ये सर्वात कमी त्रुटी दर आणि सर्वोच्च निष्ठा आहे (संलग्न तक्ता पहा). सजीवांच्या शरीरात निर्मार्ण होणारे द्रव्य निवड व्यतिरिक्त, संशोधक प्रतिक्रिया परिस्थिती अनुकूल करून पीसीआर उत्परिवर्तन दर कमी करू शकतात, ज्यात बफर रचना, थर्मोस्टेबल पॉलिमरेझची एकाग्रता आणि पीसीआर सायकल क्रमांक ऑप्टिमाइझ करणे समाविष्ट आहे.

तुमचा संदेश इथे लिहा आणि आम्हाला पाठवा

उत्पादनांच्या श्रेणी

आम्हाला का निवडावे

स्थापनेपासून, आमचा कारखाना तत्त्वाचे पालन करून प्रथम जागतिक दर्जाची उत्पादने विकसित करीत आहे
प्रथम गुणवत्तेचे. आमच्या उत्पादनांनी उद्योगात उत्कृष्ट प्रतिष्ठा मिळवली आहे आणि नवीन आणि जुन्या ग्राहकांमध्ये मूल्यवान विश्वास आहे.

चौकशी